心脏骤停(cardiac arrest,CA)是指心脏泵血功能突然停止,造成全身血液循环中断、呼吸停止和意识丧失,其发生率逐年升高,且预后不佳,存活率与神经功能恢复良好率较低。据统计,在我国,院外心脏骤停(out-of-hospital cardiac arrest, OHCA)出院存活率和神经功能恢复良好率分别为1.15%和0.83%[1],院内心脏骤停(in-hospital cardiac arrest,IHCA)出院存活率为9.1%,神经功能恢复良好率为6.4%[2]。据郑州市数据统计,近十年间院外实施心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation, CPR)患者高达36 331例,且CPR例数逐年增加[3],心脏骤停是人类面临的重大公共健康问题。
CA后自主循环恢复(restoration of spontaneous circulation, ROSC)的患者病死率高,在很大程度上可归因于心脏骤停后综合征(post-cardiac arrest syndrome, PCAS),其发生发展过程中最主要的病理生理机制为全身性缺血再灌注损伤[4]。由于缺血导致的早期损伤和再灌注导致的延迟损伤,引发心肌细胞自噬、焦亡、铁死亡和坏死性凋亡等,在此过程中,伴随着活性氧过量产生,加剧氧化应激,激活炎症通路,触发炎性细胞因子释放,引发全身性炎症反应综合征(systemic inflammatory response, SIRS)[5-6]。故笔者推测炎症指标对CA预后有一定的预测价值,且有研究表明,CA引起的器官功能障碍可能是一种类似于脓毒症样的综合征[7],这也证明CA与全身炎症反应密切相关。此外,在脓毒症及PCAS这类全身炎症状态下,血管通透性增加和白蛋白的跨毛细血管丢失会导致急性低蛋白血症[8],而现有研究表明,血清白蛋白也已是休克、低血容量、癌症、急性呼吸窘迫综合征、肝脏疾病、复苏和PCAS等危重症疾病中有价值的血清学标志物[9-12]。
C反应蛋白与白蛋白的比值(C-reactive protein to albumin ratio, CAR)是一种综合了炎症与营养不良的新型复合炎症指标,近年来,据研究显示,其在预测新型冠状病毒肺炎、脓毒症、急性胰腺炎等危重症疾病预后方面有突出价值[13-15],国外有研究表明[16],CAR是院外CA患者住院死亡的独立危险因素,但国内该方面研究较为空白,联合其他指标对预测患者预后价值的研究未见相关报道。本研究基于国内数据,探讨CA与新型炎症指标CAR的关系,为CA的临床救治提供参考,并对国外数据加以验证与支持。
1 资料与方法 1.1 研究对象回顾性收集2021年1月至2023年5月郑州大学第一附属医院收治的心肺复苏后符合自主循环恢复诊断标准[17]的患者作为研究对象,根据出院时存活情况,将患者分为存活组和死亡组。
纳入标准:⑴本院收治的心肺复苏后恢复自主循环的患者;⑵年龄≥18岁。排除标准:⑴由外院CPR并经过治疗后转入本院继续治疗的患者;⑵ROSC后住院时长小于24 h的患者;⑶孕妇或者哺乳期;⑷创伤性CA患者;⑸既往患恶性消耗性疾病及自身免疫性疾病的患者;⑹患有影响血清白蛋白合成的肝脏疾病或导致C反应蛋白升高的感染性疾病;⑺病历资料缺失的患者;⑻顽固性CA的患者。
本研究符合医学伦理学标准,已获得郑州大学第一附属医院科研和临床试验伦理委员会批准(审批号:2023-KY-1234-002)。
1.2 数据采集收集两组患者的年龄、性别、身体质量指数(body mass index,BMI)、基础疾病、CA的时间及地点、CA时的初始节律、CPR持续时间、升压药物使用剂量、ICU住院天数、入ICU时的APACHE Ⅱ评分(acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ, APACHE Ⅱ)等一般资料和CPR后首次采集的各项实验室指标(血气分析、血常规、凝血功能、肝肾功能、炎症指标、心肌酶、BNP等),以C反应蛋白与血清白蛋白的比值计算CAR。
1.3 统计学方法采用SPSS 27.0及GraphPad Prism 9.5统计软件进行统计分析。计量资料进行正态性检验,其中符合正态分布的数据以均数±标准差(x±s)表示,并采用两独立样本t检验进行组间比较;非正态分布的以中位数(四分位数)[M(Q1, Q3)]表示,并采用Mann-Whitney U检验进行组间比较。计数资料采用例数(百分比)表示,并以χ2检验进行组间比较。将两组比较差异有统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归分析模型,以确定影响CA预后的独立危险因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各独立危险因素及联合模型的预测价值。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 两组患者一般资料比较根据纳入及排除标准,共纳入145例患者进行回顾性分析,其中存活组33例,死亡组112例。见图 1。研究人群的年龄为(58.78±15.58)岁,62.09%的患者为男性。
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图 1 纳入患者流程图 Fig 1 Include patient flow |
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存活组与死亡组之间年龄、性别、BMI、既往高血压史、糖尿病史、冠状动脉疾病史、呼吸功能不全史、肾功能不全史、CA的时间及地点、CA时的初始节律比较差异均无统计学意义(均P > 0.05)。死亡组中ICU住院天数显著低于存活组,而CPR持续时间、升压药物使用剂量、入ICU时的APACHE Ⅱ评分显著高于存活组,差异均有统计学意义(P < 0.05)。见表 1。
指标 | 总体(n=145) | 存活组(n=33) | 死亡组(n=112) | t/χ2/Z值 | P值 |
年龄(岁)a | 60(52, 70) | 58(51, 68) | 61(52, 76) | -0.899 | 0.369 |
男性(n, %) | 90(62.07) | 20(60.61) | 70(62.50) | 0.039 | 0.844 |
BMI(kg/m2)a | 23.55(19.60, 28.56) | 22.27(19.99, 26.20) | 23.77(19.55, 29.34) | -0.699 | 0.485 |
基础疾病(n, %) | |||||
高血压 | 66(45.52) | 12(36.36) | 54(48.21) | 1.443 | 0.230 |
糖尿病 | 56(38.62) | 10(30.30) | 46(41.07) | 1.247 | 0.264 |
冠状动脉疾病 | 37(25.52) | 10(30.30) | 27(24.11) | 0.515 | 0.473 |
呼吸功能不全 | 38(26.21) | 9(27.27) | 29(25.89) | 0.025 | 0.874 |
肾功能不全 | 25(17.24) | 5(15.15) | 20(17.86) | 0.131 | 0.718 |
心脏骤停地点(n, %) | 1.830 | 0.176 | |||
院外 | 24(16.55) | 8(24.24) | 16(14.29) | ||
院内 | 121(83.45) | 25(75.76) | 96(85.71) | ||
初始节律(n, %) | 1.156 | 0.282 | |||
无脉性电活动或心搏停止 | 119(82.07) | 25(75.76) | 94(83.93) | ||
室速或室颤 | 26(17.93) | 8(24.24) | 18(16.07) | ||
夜间停搏(n, %) | 55(37.93) | 10(30.30) | 45(40.18) | 1.056 | 0.304 |
CPR持续时间(min)a | 15(7, 20) | 9(4, 15) | 15(10, 23) | -3.805 | < 0.001 |
肾上腺素(mg)a | 3(2, 6) | 2(1, 3) | 4(2, 7) | -3.900 | < 0.001 |
间羟胺(mg)a | 50(0, 25) | 0(0, 100) | 100(0, 300) | -2.953 | 0.003 |
去甲肾上腺素(mg)a | 8(0, 36) | 0(0, 18) | 15(0, 47) | -2.314 | 0.021 |
ICU住院天数(d)a | 6(2, 12) | 12(6, 16) | 4(2, 9) | -3.755 | < 0.001 |
APACHEⅡ评分(分)a | 26.00(18.00, 35.00) | 18.50(13.25, 30.75) | 29.00(20.25, 35.00) | -2.390 | 0.017 |
注:a为M(Q1, Q3);BMI为身体质量指数,CPR为心肺复苏术,肾上腺素为心肺复苏期间使用的剂量,间羟胺为恢复自主循环后24 h内使用的剂量,去甲肾上腺素为恢复自主循环后24 h内使用的剂量,APACHE-Ⅱ评分为急性生理与慢性健康评分 |
两组患者乳酸、纤维蛋白原、谷草转氨酶、白蛋白、降钙素原、C反应蛋白、CAR、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶比较,差异有统计学意义(均P < 0.05)。见表 2。
指标 | 总数(n=145) | 存活组(n=33) | 死亡组(n=112) | t/χ2/Z值 | P值 |
pH a | 7.33±0.17 | 7.35±0.14 | 7.32±0.18 | 0.898 | 0.370 |
PaO2(mmHg)b | 126.00(94.30, 180.00) | 130.00(98.00, 178.00) | 121.00(94.08, 182.25) | -0.139 | 0.889 |
PaCO2(mmHg)b | 37.50(30.20, 45.00) | 37.80(31.00, 44.00) | 37.35(30.18, 45.05) | -0.212 | 0.832 |
乳酸(mmol/L)b | 6.60(3.20, 9.80) | 5.70(2.70, 8.00) | 6.75(3.78, 10.35) | -2.365 | 0.018 |
血糖(mmol/L)b | 13.40(9.60, 17.90) | 13.00(8.50, 17.40) | 13.50(9.98, 17.95) | -0.872 | 0.383 |
Na(mmol/L)b | 141.00(135.00, 146.00) | 140.00(134.60, 142.00) | 141.00(135.00, 146.25) | -1.187 | 0.235 |
K(mmol/L)b | 3.80(3.20, 4.30) | 3.60(3.20, 4.20) | 3.80(3.20, 4.30) | -0.146 | 0.884 |
Ca(mmol/L)b | 1.05(1.00, 1.12) | 1.05(1.02, 1.13) | 1.05(0.99, 1.12) | -1.168 | 0.243 |
CL(mmol/L)b | 104.00(100.00, 108.50) | 106.20(101.50, 110.00) | 103.00(99.00, 108.00) | -1.587 | 0.113 |
白细胞计数(×109/L)b | 13.44(9.50, 19.02) | 12.81(8.58, 16.22) | 13.96(9.75, 20.20) | -1.363 | 0.173 |
红细胞计数(×1012/L)a | 3.33±0.97 | 3.47±1.06 | 3.28±0.94 | 0.987 | 0.325 |
血红蛋白(g/L)a | 100.60±29.45 | 105.47±34.53 | 99.16±27.79 | 1.082 | 0.281 |
血小板计数(×109/L)b | 185.00(116.00, 259.00) | 185.00(116.00, 229.00) | 188.50(122.25, 259.00) | -0.613 | 0.540 |
中性粒细胞计数(×109/L)b | 11.50(7.44, 16.37) | 9.38(6.54, 14.37) | 11.94(8.05, 18.03) | -1.646 | 0.100 |
淋巴细胞计数(×109/L)b | 0.99(0.52, 1.99) | 1.19(0.70, 2.01) | 0.98(0.50, 1.93) | -0.891 | 0.373 |
凝血酶原时间(s)b | 13.25(12.00, 15.93) | 12.80(11.50, 15.90) | 13.30(12.00, 15.95) | -0.435 | 0.664 |
INR b | 1.18(1.07, 1.43) | 1.16(1.06, 1.43) | 1.18(1.08, 1.43) | -0.416 | 0.677 |
纤维蛋白原(g/L)b | 3.22(2.31, 4.09) | 2.77(2.13, 3.37) | 3.43(2.35, 4.26) | -2.669 | 0.008 |
D-二聚体(mg/L)b | 3.68(2.07, 8.64) | 3.58(2.22, 3.37) | 3.75(2.03, 8.99) | -0.674 | 0.500 |
纤维蛋白原降解产物(mg/L)b | 19.76(11.13, 53.29) | 15.33(10.53, 32.71) | 22.01(11.18, 54.38) | -1.254 | 0.210 |
谷丙转氨酶(U/L)b | 50.50(22.75, 152.50) | 45.00(17.00, 97.00) | 56.00(23.00, 168.50) | -1.039 | 0.299 |
谷草转氨酶(U/L)b | 74.00(32.00, 213.00) | 55.00(23.00, 126.00) | 82.50(37.00, 289.75) | -2.323 | 0.020 |
总蛋白(g/L)a | 57.22±10.44 | 58.63±11.99 | 56.80±9.96 | 0.883 | 0.378 |
白蛋白(g/L)a | 30.45±7.15 | 34.40±7.04 | 29.46±6.86 | 3.390 | < 0.001 |
球蛋白(g/L)b | 26.80(22.00, 30.50) | 24.50(21.50, 30.70) | 27.15(22.68, 30.28) | -1.174 | 0.240 |
总胆红素(μmol/L)b | 10.60(7.30, 19.20) | 10.50(8.40, 17.20) | 11.30(7.15, 19.35) | -0.698 | 0.485 |
直接胆红素(μmol/L)b | 5.70(3.70, 10.80) | 6.10(3.90, 8.40) | 5.50(3.70, 10.90) | -0.009 | 0.992 |
间接胆红素(μmol/L)b | 4.80(2.60, 8.60) | 4.80(3.40, 8.60) | 4.75(2.38, 8.53) | -0.781 | 0.435 |
总胆固醇(mmol/L)b | 3.37±1.81 | 3.55±1.59 | 3.32±1.88 | 0.426 | 0.672 |
甘油三酯(mmol/L)b | 1.26(0.77, 1.77) | 1.32(0.77, 1.78) | 1.24(0.79, 1.74) | -0.060 | 0.952 |
肌酐(μmol/L)b | 106.00(67.00, 170.00) | 85.00(63.00, 138.00) | 108.00(71.50, 185.50) | -1.356 | 0.175 |
尿素(mmol/L)b | 8.80(5.90, 16.00) | 7.85(5.43, 15.70) | 9.69(6.34, 16.05) | -0.441 | 0.659 |
降钙素原(ng/mL)b | 0.85(0.12, 5.24) | 0.21(0.07, 0.92) | 1.37(0.22, 7.85) | -3.328 | < 0.001 |
C反应蛋白(mg/L)b | 49.68(17.43, 114.09) | 25.19(2.80, 70.00) | 61.16(24.29, 129.24) | -3.238 | 0.001 |
CAR b | 1.60(0.51, 3.99) | 0.23(0.03, 1.09) | 2.09(0.80, 4.72) | -4.123 | < 0.001 |
肌钙蛋白(ng/mL)b | 0.063(0.015, 0.250) | 0.050(0.012, 0.134) | 0.070(0.015, 0.292) | -1.292 | 0.196 |
肌红蛋白(ng/mL)b | 279.90(120.40, 755.00) | 218.00(86.65, 315.75) | 323.00(137.95, 900.00) | -2.265 | 0.024 |
BNP(pg/mL)b | 753.27(197.78, 3224.81) | 597.71(58.21, 3204.50) | 753.27(242.89, 3224.81) | -0.942 | 0.346 |
肌酸激酶(U/L)b | 177.60(112.75, 397.55) | 135.00(107.00, 263.00) | 259.20(116.00, 411.80) | -1.338 | 0.181 |
肌酸激酶同工酶(U/L)b | 38.80(20.20, 59.05) | 30.30(18.40, 46.50) | 41.95(21.80, 61.65) | -2.040 | 0.041 |
乳酸脱氢酶(U/L)b | 409.00(300.85, 635.75) | 382.00(276.00, 448.00) | 419.00(325.20, 667.00) | -1.644 | 0.100 |
注:a为(x±s),b为M(Q1, Q3);INR为国际标准化比值,CAR为C反应蛋白与白蛋白的比值,BNP为B型钠尿肽 |
将两组患者上述资料比较中有意义的指标纳入二分类多因素Logistic回归分析,包括CPR持续时间、肾上腺素、间羟胺、去甲肾上腺素、ICU住院天数、APACHEⅡ评分、乳酸、纤维蛋白原、谷草转氨酶、降钙素原、CAR、肌红蛋白及肌酸激酶同工酶,为避免共线性,未纳入白蛋白及C反应蛋白,结果显示,CAR(OR=2.372,95%CI: 1.094~5.146,P < 0.05)及CPR持续时间(OR=1.170,95%CI: 1.020~1.342,P < 0.05)是CA患者预后不良的独立危险因素。见表 3。
影响因素 | β | SE | Wald | P值 | OR值 | 95%CI |
CAR | 0.864 | 0.395 | 4.782 | 0.029 | 2.372 | 1.094~5.146 |
CPR持续时间 | 0.157 | 0.070 | 5.047 | 0.025 | 1.170 | 1.020~1.342 |
常量 | -4.944 | 1.833 | 7.276 | 0.007 | 0.007 | |
注:CAR为C反应蛋白与白蛋白的比值,CPR为心肺复苏 |
以CA患者预后(死亡=1)为状态变量,白蛋白、C反应蛋白、CAR、CPR持续时间、CAR联合CPR持续时间及C反应蛋白联合CPR持续时间为检验变量绘制ROC曲线。结果显示,CAR比C反应蛋白及白蛋白单独预测CA患者预后的AUC大,但其特异度不高,将CAR、CAR联合CPR持续时间、C反应蛋白联合CPR持续时间的AUC进行比较,结果显示,CAR联合CPR持续时间的AUC最大,可见其对心脏骤停患者预后预测价值最大,且特异度及敏感度均较高。因此,CAR联合CPR持续时间对于心脏骤停患者预后的预测价值显著优于白蛋白、C反应蛋白及CAR单一指标及C反应蛋白联合CPR持续时间这一联合指标,当CAR > 1.455、CPR持续时间 > 11.5 min时提示患者预后较差。见表 4、图 2。
指标 | AUC | 95%CI | 截断值 | 敏感度(%) | 特异度(%) | 约登指数 |
白蛋白(g/L) | 0.699 | 0.579~0.819 | 34.950 | 0.571 | 0.821 | 0.393 |
C反应蛋白(mg/L) | 0.709 | 0.598~0.821 | 32.915 | 0.640 | 0.686 | 0.326 |
CAR | 0.792 | 0.682~0.902 | 1.455 | 0.850 | 0.631 | 0.481 |
CPR持续时间(min) | 0.731 | 0.628~0.834 | 11.500 | 0.724 | 0.670 | 0.394 |
CAR联合CPR持续时间 | 0.859 | 0.745~0.973 | 0.781 | 0.824 | 0.819 | 0.643 |
C反应蛋白联合CPR持续时间 | 0.821 | 0.716~0.926 | 0.808 | 0.857 | 0.699 | 0.556 |
注:CAR为C反应蛋白与白蛋白的比值,CPR为心肺复苏 |
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A为白蛋白对心肺复苏患者预后的ROC曲线;B为C反应蛋白对心肺复苏患者预后的ROC曲线;C为CAR对心肺复苏患者预后的ROC曲线;D为CPR持续时间对心肺复苏患者预后的ROC曲线;E为CAR联合CPR持续时间联合对心肺复苏患者预后的ROC曲线;F为C反应蛋白与CPR持续时间联合对心肺复苏患者预后的ROC曲线 图 2 各指标及联合指标对CA患者预后的预测ROC曲线 Fig 2 ROC curve for predicting prognosis of CA patients using various indicators and combined indicators |
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C反应蛋白作为一种急性时相反应物,主要由肝细胞产生,是一种全身炎症反应标志物[18]。白蛋白可以反映身体的营养状况[19],也可通过反映疾病所致机体的消耗程度而间接判定炎症程度[20]。C反应蛋白与白蛋白比值(C-reactive protein to albumin ratio, CAR)是C反应蛋白与白蛋白水平的比值,是一种综合了炎症与营养不良的新型复合炎症指标[21]。近年来,CAR在急危重症领域的研究取得重大进展[22],Ranzani等[21]和Kim等[23]用CAR评估脓毒血症患者90 d病死率及感染性休克患者的预后,发现CAR是患者死亡的独立相关因素。Park等[24]发现,CAR是危重症患者28 d病死率的独立预测因素,在危重病患者中,较高的CAR与病死率的增加有关。也有研究表明[25],CAR预测直接经皮冠状动脉介入治疗ST段抬高型心肌梗死无复流的价值较C反应蛋白、白蛋白水平、白细胞计数更高,可见CAR对于危重症疾病预后的预测价值极大。
CAR对CA后患者的预后也有一定预测价值,Bingol等[16]发现,CA患者中,住院死亡组的CAR水平显著高于存活组(1.6 vs. 0.5,P < 0.001),CAR(OR=1.971,95%CI:1.327~2.930,P=0.001)是住院死亡的独立预测因素。这与本研究结果较一致,本研究显示,在心脏骤停患者中,死亡组CAR显著高于存活组(2.09 vs. 0.23,P < 0.001),多因素Logistic回归分析表明,CAR(OR=2.372,95%CI:1.094~5.146,P=0.029)是CA患者预后的独立影响因素,此外,本研究结果还表明,CAR升高提示炎症反应重、营养状态差,CAR的截断值是1.455,当CAR > 1.455时,提示预后不佳,当CAR与CPR持续时间作为联合指标预测预后时,其预测价值明显优于单一指标。
目前最广泛研究的血清生物标志物是神经元特异烯醇化酶(NSE)和S100钙结合蛋白B(S100 B),并且为指南所推荐[26],然而,早期使用NSE作为预测指标是没有用的,因为至少需要在ROSC后24 h使用NSE浓度来预测结果[27-29],在本研究中,CAR不仅可以在ROSC后早期获得,并且可以有效预测预后,ROSC后患者的CAR较低,提示出院时存活的可能性更大,CAR作为评估CA患者预后的指标是可行的,且作为血清生物标志物有相对容易获得、快速起效和可重复性的优点。
CAR的变化与诸多机制有关。有研究表明[30],脓毒症并发ARDS引起CAR升高主要与肺毛细血管渗漏有关。但是在急性心血管疾病中,多数学者认为[31-32],CAR升高与冠状动脉血栓形成有关,但血栓形成引起CAR升高机制尚未明确。在CA时,再灌注损伤加剧氧化应激,会引起炎症因子的释放,引起全身炎症反应综合征,C反应蛋白作为一种急性时相反应物,在组织损伤时会迅速升高。有学者认为[33],心脏骤停后缺氧性脑损伤会导致血管通透性增加和血脑屏障水肿,血管通透性的增加导致血清白蛋白的丢失,从而导致缺血缺氧损伤后白蛋白水平的降低,也有研究表明[34],炎症反应中由于炎症介质的作用,也会导致毛细血管通透性增加而使白蛋白渗漏。综合多种影响因素,CAR可以反映C反应蛋白和白蛋白水平的稳定性,并且该指标可在入院时检测并迅速得到检测结果,本研究结果表明高C反应蛋白水平和低白蛋白水平与心脏骤停患者的预后不良相关。
对于CAR的临界值,本研究结果显示CAR预测心脏骤停患者预后的最佳临界值为1.455;Karakoyun等[35]认为,CAR升高可用于鉴别重症COVID-19患者, 最佳临界值为0.9;Li等[36]认为,CAR≥1.843时患者有较高的住院病死率、重症监护病房(ICU)入院率、更长的有创机械通气使用时间和住院时间;李盛等[37]发现,CAR可独立预测重症急性胰腺炎患者预后, 最佳临界值为3.95。这些研究及本研究结果各不一致,除去病种原因不同,笔者认为,心肺复苏后的炎症反应及抗炎治疗方案对CAR值的大小起到关键作用,例如,亚低温治疗可以使细胞因子分泌减少,减弱白细胞的迁移和吞噬作用,从而抑制炎症反应[38]。另外,CAR临界值与检测时间点有密切关系,本研究实验室指标均为ROSC后首次采集的指标,随着时间的延迟,炎症反应加重,CAR临界值或许会升高,但CAR在预测心肺复苏的最佳临界值方面的研究较少,尚无统一结论。
综上所述,本研究结果显示,CAR和CPR持续时间是影响心脏骤停患者预后的独立影响因素,当CAR > 1.455、CPR持续时间 > 11.5 min时提示患者预后较差,可指导临床对于心脏骤停患者治疗方案进行调整。本研究具有一定的局限性,首先,本研究仅为单中心回顾性研究,样本量偏小,后续需要进一步进行多中心、大样本的临床前瞻性研究;其次,只收集了心肺复苏后首次的实验室指标,为单一时间点的指标,因此CAR的连续性指标是否可以影响心肺复苏患者预后及机制需进一步研究;最后,随访时间较短,不能预测其长期生存情况,需进一步延长随访时间以判断其对长期预后的预测价值。
利益冲突 所有作者声明无利益冲突
作者贡献声明 周岩:实施研究、分析/解释数据、论文撰写;张唐娟、贾欣雅:数据收集及整理;吕青、李仁杰:统计学分析、支持性贡献;兰超、雷如意、张强:研究设计、论文修改
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