目的 探讨tubastatin A（TubA）通过抑制内质网应激介导的细胞凋亡而减轻猪心脏骤停-心肺复苏（cardiac arrest-cardiopulmonary resuscitation, CA-CPR）后脑损伤的作用及机制。方法 普通级雄性白猪23头，体质量33～40 kg，月龄4-6月，采用随机数字表法分为3组：假手术（sham, S）组（n=6）、CA-CPR组（n=9）和TubA组（n=8）。CA-CPR组经右心室电极放电诱发CA 9 min、然后CPR 6 min的方法制备猪CA-CPR模型。TubA组同上方法制备猪CA-CPR模型，并于复苏后5 min时经静脉泵入TubA 4.5 mg/kg、时长1 h。于造模前及复苏后1 h、2 h、4 h和24 h时，经静脉采集血标本，应用ELISA法检测神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase, NSE）和S100β蛋白（S100β protein, S100β）血清浓度。于复苏后24 h时，进行神经功能缺损评分（neurological deficit score, NDS）。随即处死动物，取大脑皮层组织，应用免疫组织化学染色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12（caspase-12）和caspase-3表达水平，TUNEL法检测细胞凋亡指数。应用SPSS软件对三组数据进行单因素方差分析和Bonferroni 事后检验。结果 复苏后24h观察期间，与S组比较，CA-CPR组和TubA组NSE和S100β血清浓度均明显增加，同时NDS评分显著升高（均P<0.05）；与CA-CPR组比较，TubA组复苏2h后NSE与复苏1h后S100β血清浓度均明显减少[NSE（ng/ml）：2h为23.1±2.0和20.2±2.0，4h为28.4±2.3和23.7±1.9，24h为32.1±2.7和26.6±2.0；S100β（pg/ml）：1h为2239±193和1923±101，2h为2817±157和2360±141，4h为3384±250和2691±210，24h为3965±303和3119±260，均P<0.05]，同时NDS评分显著降低（240±30和63±44，P<0.05）。复苏后24h时大脑皮层组织检测显示，与S组比较，CA-CPR组和TubA组caspase-12和caspase-3蛋白表达明显增加，细胞凋亡指数显著升高（均P<0.05）；与CA-CPR组比较，caspase-12和caspase-3蛋白表达明显减少（caspase-12：7.1±0.7和4.2±0.4；caspase-3：13.3±1.6和7.7±0.8，均P<0.05），细胞凋亡指数显著降低（31.1±8.6和17.3±2.2，P<0.05）。结论 TubA减轻猪CA-CPR后脑损伤与神经功能障碍，可能与抑制内质网应激介导的细胞凋亡有关。

陈闯,马霜霜,骆立新, 赵峻峰. Tubastatin A抑制内质网应激凋亡途径减轻猪复苏后脑损伤的作用及机制研究[J]. 中华急诊医学杂志, 2023,32(6): 796-801.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2023.06.014

基金项目：浙江省医药卫生科技计划项目（2019KY258、2020KY005）
伦理审批号：浙江大学医学院附属第二医院动物伦理委员会（2021-103）

关键词： 心脏骤停 心肺复苏 脑损伤 内质网应激 细胞凋亡