目的 探讨基因沉默诱导型环氧化酶（cyclooxygenase-2, COX-2）联合高压氧（ hyperbaric oxygen, HBO）对脑出血大鼠神经细胞水肿、凋亡、自噬及神经功能修复影响。 方法 SPF级成年雄性SD大鼠（n=96），立体定向下于尾状核注射凝血酶Ⅶ构建脑出血模型。采用随机数字法分为4组（n=24/组）：对照组、HBO组、COX-2RNAi组及联合组。构建靶向沉默COX-2基因表达的siRNA质粒。大鼠分组治疗后，每组再随机抽取4只大鼠用于每类项目检测。术后第1、7、14天采用神经功能缺损评分（modified neurological severity score, mNSS评分）评估。术后第7天，干/湿比重法检测脑组织含水量；Evans法检测血脑屏障通透性；AnnexinV法及TUNEL法检测神经细胞凋亡率；RT-PCR法检测脑组织COX-2的mRNA表达水平；免疫蛋白印迹法（westernblot，WB）检测自噬相关蛋白Beclin-1、COX-2、水通道蛋白4（aquaporin4, AQP-4）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/lewkmia, Bcl-2）、半胱天冬酶-3（Caspase-3）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1, HIF-1α）、基质金属蛋白-2/9（matrixmetalloproteinase-2/9, MMP-2/9）表达水平。采用 SPSS 软件对组间多样本行单因素方差分析，进一步两两比较采用 LSD-t 检验。 结果 SD大鼠脑出血模型、质粒构建均获成功。术后第7、14天，与对照组比较，COX-2RNAi、HBO、联合组mNss评分均明显降低（均P<0.01），以联合组效果最优（P<0.01）。术后第7天，与对照组比较，各治疗组脑组织含水量、血脑屏障通透性均明显降低（均P<0.05），以联合组降低最明显（P<0.01）。神经细胞凋亡率各治疗组与对照组相比均有所下降（均P<0.05），以联合组下降最明显（P<0.01）。COX-2mRNA表达水平各治疗组均较对照组明显降低（均P<0.01），以联合组沉默COX-2表达最明显（P<0.05）。WB结果显示，与对照组比较，各治疗组均能降低Beclin-1、COX-2、AQP-4、Caspase-3、HIF-1α、MMP-2/9蛋白表达（均P<0.05），而增加Bcl-2表达（均P<0.01），其中以联合组趋势最明显（P<0.01）。结论 基因沉默COX-2协同高压氧可有效修复脑出血大鼠神经功能，其机制可能与降低血脑屏障通透性，减轻脑水肿，抑制神经细胞凋亡、自噬有关。

潘强,朱琳,高勇,朱军,张帅,李强,刁兴涛,宋纯玉. 基因沉默诱导型环氧化酶协同高压氧对脑出血大鼠神经功能修复及细胞凋亡、自噬的影响[J]. 中华急诊医学杂志, 2024,33(1): 39-46.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2024.01.007

基金项目：山东省医药卫生科技发展计划项目（2017WS645，202104040585）；山东省老年医学学会科技攻关项目（LKJGG2021Y026）；济南市临床医学科技创新计划项目（202134059）；济南市卫生健康人才优秀青年技术骨干项目（济卫科教发[2019]7号）

关键词： 脑出血 高压氧 环氧化酶-2 自噬 凋亡