目的：研究促凋亡基因Par-4沉默对氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法：培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞。利用过氧化氢诱导细胞凋亡。利用小RNA干扰(siRNA)技术，靶向诱导Par-4基因沉默。设立正常对照组(常规培养细胞)、过氧化氢组(1.0 mmol/L过氧化氢处理细胞)、过氧化氢+Par-4-siRNA组(1.0 mmol/L过氧化氢和Par-4-siRNA转染的细胞)。设非抑制序列转染的对照组。流式细胞术测定各组细胞凋亡百分率。Western blot检测促凋亡基因Smac蛋白表达量。凝胶迁移率改变试验测定转录因子E2F1的DNA结合力。比色法检测Caspase-3酶活性。实验结果采用单因素方差分析(F检验和g检验)。结果：过氧化氢+Par-4-siRNA组细胞凋亡百分率(29.7±2.3)%显著低于过氧化氢组(54.2±4.1)%，q=8.91，P＜0.01.Par-4-siRNA的转染显著抑制过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞中Smac蛋白表达、E2F1DNA结合力和caspase-3活性上调。结论：采用siRNA诱导Par-4基因沉默，可减少氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡。其分子机制可能和抑制Smac蛋白表达、抑制E2F1 DNA结合力和抑制caspase-3活性有关。

秦晓虹,薛梅,陆超. 沉默Par-4基因表达可抑制肺泡上皮细胞凋亡[J]. 中华急诊医学杂志, 2011,20(3): 269-272.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2011.03.013


关键词： Par-4 小RNA干扰 氧化应激 肺泡上皮细胞 凋亡