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Study on expression level changes of axon guidance cues Slit2 and Robo4 in lung tissue of acute lung injuried rats.
作者：李霖,卿国忠,杨靖,唐卓,彭正良,张克娜,丁灿
发布日期：2014-03-04
目的 观察神经导向因子Slit2及Robo4在肺组织的表达并探讨二者在ALI发病中的作用。方法在南华大学实验动物部将48只SD雄性大鼠随机（随机数字法）分为对照组(n=24)与ALI组(n=24)。ALI组采用盲肠结扎穿孔术复制急性肺损伤模型，对照组只开腹关腹，不行盲肠结扎穿孔术，以血清炎症因子浓度、动脉血氧分压(PaO2)、组织水肿、肺部特征性病理改变作为ALI模型成功主要指标。两组又分为术后12、24、48 h 3个组，每组8只。取大鼠动脉血测定PaO2；取肺组织测定湿/干质量(W/D)比值，并观察肺毛细血管通透性及组织病理学改变； ELISA检测血清TNF-α水平；RT-PCR测定肺组织Slit2及Robo4 mRNA表达，免疫组织化学法观察蛋白表达情况。采用SPSS13.0统计软件行单因素方差分析，P＜0.05为差异具有统计学意义。结果与对照组比较，ALI组致伤后各时间点PaO2均降低，肺W/D比值、肺毛细血管通透性、血清TNF-α水平均升高（P＜0.05），病理观察显示肺组织受损；RT-PCR结果显示ALI组12 h,24 h,48 h肺组织Slit2mRNA表达量较同期对照组下降［(0.56±0.13) vs. (0.87±0.05),F=41.39,P＜0.05,(0.42±0.10) vs. (0.85±0.07),F=93.54 P＜0.05,(0.26±0.08) vs. (0.89±0.09),F=227.05,P＜0.05］；ALI组肺组织Robo4 mRNA表达量与同期对照组比较，差异无统计学意义［(0.86±0.07)vs.(0.83±0.05),F=0.695,P>0.05,(0.82±0.05)vs. (0.89±0.08),F=2.061,P>0.05,(0.85±0.08)vs.(0.86±0.05),F=0.035,P>0.05］；免疫组织化学研究显示Slit2主要表达于内皮细胞膜上，亦可表达于肺上皮细胞胞核及胞浆，Robo4则只表达于内皮细胞膜上；ALI组3个时间点肺组织Slit2蛋白表达量较同期对照组下降［(0.37±0.05) vs.( 0.45±0.07),F=6.82,P＜0.05,(0.32±0.06) vs. (0.47±0.09),F=23.54,P＜0.05,(0.28±0.07)vs.(0.46±0.06),F=28.01,P＜0.05］；与对照组比较，ALI组肺组织Robo4蛋白表达量差异无统计学意义［(0.53±0.04) vs. (0.52±0.05),F=0.155,P>0.05,(0.53±0.09) vs. (0.50±0.05),F=0.498,P>0.05,(0.55±0.06) vs. (0.56±0.07),F=0.073,P>0.05］。结论对照组大鼠肺组织可表达Slit2及Robo4，盲肠结扎穿孔致ALI大鼠肺组织Slit2表达下降，这可能与ALI发病有关。
李霖,卿国忠,杨靖,唐卓,彭正良,张克娜,丁灿. 急性肺损伤大鼠肺组织神经导向因子Slit2及Robo4的表达[J]. 中华急诊医学杂志, 2014,23(3): 261-266.DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2014.03.006
基金项目：湖南省科技厅(2011FJ3170)
关键词： slit2 Robo4 急性肺损伤 脓毒症 内皮渗漏
