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目的 探讨生物钟基因brain and muscle arnt-like 1(Bmal1)对急性高糖诱导的胰岛素瘤细胞-1(insulinoma cell lines-1,INS-1)细胞凋亡的作用。方法 将INS-1 细胞分为 6 组:正常糖浓度对照组(NG)、高糖组(HG)、NG+ 空载体组(NG+pcDNA3.1)、NG+Bmal1 基因过表达组(NG+pcDNA3.1-Bmal1)、HG+ 空载体组(HG+pcDNA3.1)、HG+Bmal1 基因过表达组(HG+pcDNA3.1-Bmal1)。NG 组和HG 组分别含5.5 mmol/L 和33.3 mmol/L 葡萄糖。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率,TUNEL法检测细胞凋亡率。实时荧光定量PCR( RT-qPCR)测Bcl-2、Bax 和Caspase-3 mRNA 表达,蛋白印迹法(Western-blot)检测Bcl2、Bax 和Caspase-3 蛋白表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,各组均数两两比较用SNK-q检验。结果 HG 组较NG组细胞增殖率下降[(44.17±1.25)% vs(100±1.48)%,P<0.01],凋亡率增加[(1.86±0.28)%vs(0.56±0.04)%,P<0.01],Bcl2 mRNA 和蛋白表达下降(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达增加(P<0.01);HG+pcDNA3.1-Bmal1 组较HG+pcDNA3.1 组细胞增殖率升高[(64.40±1.98)% vs(43.82±1.07)%,P<0.01],凋亡率下降[(0.95±0.26)% vs( 1.66±0.15)%,P<0.05],Bcl2 mRNA 和蛋白表达增加(P<0.01),Bax、Caspase-3 mRNA 和蛋白表达下降(P<0.01)。与NG+pcDNA3.1 组比较,NG+pcDNA3.1-Bmal1 组增殖率、凋亡率、Bcl2、Bax 和Caspase-3 表达均无明显变化(P>0.05)。结论 Bmal1 可能通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路减轻急性高糖导致的胰岛β 细胞凋亡,对β 细胞起保护作用
叶绿,许伟红,张婷,吴华香. Bmal1对急性高糖诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其机制[J]. 中华急诊医学杂志, 2020,29(7): 941-945.