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Effect of lilalutride on cardiac fibroblasts activation induced by angiotension II
作者：杜优优,姚瑞,高路,孙同文
发布日期：2020-11-09
目的 探讨利拉鲁肽对心肌成纤维细胞活化增殖和分泌功能的影响。方法 分离培养原代大鼠乳鼠心脏成纤维细胞，采用血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, AngⅡ）刺激诱导成纤维细胞活化增殖，采用不同浓度的利拉鲁肽（0、1、50、100、200 nmol/L）处理成纤维细胞。采用CCK8试剂盒检测细胞活性，采用MTT试剂盒检测细胞增殖，采用免疫荧光双染检测细胞平滑肌肌动蛋白α（smooth muscle actin α，α-SMA）和Ⅲ型胶原的表达，采用RT-PCR检测细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA和转化生长因子β1（transforming growth factor-β1，TGFβ1）的mRNA表达水平，采用免疫印迹检测相关蛋白的表达改变。采用SPSS 23.0软件进行分析，多组样本比较采用单因素方差分析，事后检验采用LSD-t检验。结果 不同浓度的利拉鲁肽处理不影响成纤维细胞活性（F=1.59, P>0.05）；AngⅡ组细胞增殖明显增加，1、50、100、200 nmol/L的利拉鲁肽细胞增殖水平明显低于AngⅡ组（F=231.22，P<0.05）；AngⅡ组细胞α-SMA和Ⅲ型胶原的表达明显增加，100 nmol/L和200 nmol/L利拉鲁肽组细胞α-SMA和Ⅲ型胶原的表达水平明显降低（F=134.45，P<0.05）；AngⅡ组细胞Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA和TGFβ1的mRNA表达水平高于对照组，100 nmol/L和200 nmol/L利拉鲁肽组细胞上述因子的mRNA水平明显低于AngⅡ组（F值分别为121.23、143.32、125.43、98.21；均P<0.05）；通过免疫印迹检测发现，AngⅡ组细胞中磷酸化的smad2、smad3以及smad4的表达明显高于对照组（F值分别为32.12、42.32、26.54；均P<0.05），但200 nmol/L利拉鲁肽组细胞中上述因子与AngⅡ组差异无统计学意义；AngⅡ组细胞中磷酸化的蛋白激酶B（AKT）明显高于对照组，200 nmol/L利拉鲁肽组细胞中磷酸化的AKT明显低于AngⅡ组（F=112.73；P<0.05）。结论 利拉鲁肽可以减轻AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞活化、增殖和分泌功能，主要通过抑制AKT磷酸化机制发挥作用。
杜优优,姚瑞,高路,孙同文. 利拉鲁肽对大鼠心肌成纤维细胞调控机制研究[J]. 中华急诊医学杂志, 2020,29(11): 1425-1431.DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2020.11.008
基金项目：中原科技创新领军人才（194200510017）；河南省医学科技攻关计划省部共建项目（SBGJ2018020）；河南省卫生计生科技创新型人才“51282”工程（2016-32）；郑州市科技惠民计划项目（2019KJHM0001）
关键词： 利拉鲁肽;心肌纤维化;心肌成纤维细胞;血管紧张素 蛋白激酶B
