目的 观察脓毒症患者外周血Toll样受体（TLR）表达谱变化，分析活化TLR7对脓毒症患者CD8+T细胞杀伤活性的影响。方法 采用横断面研究方法，选择58例脓毒症患者和24例对照者，于就诊本院后1h内采血，分离外周血单个核细胞（PBMCs），逆转录实时定量PCR法检测PBMCs中TLR1~10 mRNA相对表达量，流式细胞术检测CD8+T细胞中TLR7和TLR9表达，分析TLR对预后的诊断价值。分选CD8+T细胞，使用TLR7激动剂CL097刺激CD8+T细胞，CD8+T细胞与人脐静脉内皮细胞直接/间接接触共培养，检测免疫检查点受体表达、靶细胞死亡比例、毒性分子和细胞因子分泌。结果 PBMCs中TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR8和TLR10 mRNA相对表达量在脓毒症患者和对照者之间的差异无统计学意义（P>0.05）。脓毒症患者PBMCs中TLR9 mRNA低于对照者（P=0.046），但CD8+T细胞中TLR9平均荧光强度（MFI）与对照者无显著差异（P=0.548）。脓毒症患者PBMCs中TLR7 mRNA和CD8+T细胞中TLR7平均荧光强度（MFI）均低于对照者（P<0.001），对脓毒症患者存活组和死亡组TLR7水平进行ROC曲线分析，TLR7 mRNA和TLR7 MFI曲线下面积分别为0.702和0.732，P值分别为0.018和0.007，预测价值较好。脓毒症患者存在CD8+T细胞功能衰竭，表现为免疫检查点受体mRNA表达升高、直接接触杀伤功能及分泌毒性分子、细胞因子水降低（P<0.05）。TLR7激动剂CL097刺激对脓毒症患者CD8+T细胞中免疫检查点受体mRNA表达无明显影响（P>0.05）。在直接接触共培养体系中，CL097刺激可增加脓毒症患者CD8+T细胞诱导靶细胞死亡比例，促进毒性分子和细胞因子分泌（P<0.05）。在间接接触共培养体系中，虽然CL097刺激可促进脓毒症患者CD8+T细胞分析干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α分泌（P<0.05），但诱导靶细胞死亡比例和毒性分子分泌在经CL097刺激和无CL097刺激之间的差异无统计学意义（P>0.05）。结论 TLR7水平降低对脓毒症患者预后不佳有提示意义。脓毒症患者存在CD8+T细胞功能衰竭，TLR7激动剂可增强脓毒症患者CD8+T细胞杀伤功能。

李伟伟,朱斌. 活化Toll样受体7增强脓毒症患者CD8+T细胞杀伤活性[J]. 中华急诊医学杂志, 2024,33(7): 1011-1018.
DOI号:10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2024.07.021

基金项目：河南省医学科技攻关计划项目（SB201901062）
伦理审批号：新乡医学院第一附属医院伦理委员会（EC-023-467）

关键词： 脓毒症 Toll样受体 CD8+T淋巴细胞 杀伤